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    滅活效果測試——復達客戶檢測案例

    2021年12月25日,客服中心反饋眉山市某中藥材有限公司關于中藥艾條的檢測,接到反饋后,實驗室工程師第一時間與客戶進行詳細溝通,情況如下:


    客戶背景


    客戶是一家中藥材公司,想要對自己家的中藥艾條結核桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌滅活效果進行檢測,通過網絡平臺找到我們,咨詢具體項目并出具專業的第三方檢測報告。


    樣品名稱


    中藥艾條


    客戶需求


    根據客戶提供的樣品,確定樣品具體測試的條件時間和項目,然后提供相關的樣品進行測試,出具專業的第三方檢測報告。


    解決方案


    溝通客戶寄送樣品,實驗室接收到樣品及說明書后開始進行最終的確認測試。客戶提供的測試要求相對而言比較嚴格,收到樣品后我們立刻溝實驗室進行測試的協調,實驗中我們使用了不同菌種、不不同模擬環境進行測試。從而順利進行測試。同時針對客戶的要求我們進行了多次模擬


    測試項目:根據樣品說明書確定了測試項目:有結核桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌滅活效果,部分測試結果如下:


    測試結果


    一、菌株:


    大腸桿菌ATCC 25922、金黃色葡萄球菌ATCC 6538、龜分支桿菌膿腫亞種ATCC 93326


    二、菌液的制備:


    取菌種第5代~14代的營養瓊脂培養基斜面新鮮培養物(大腸桿菌和金黃色葡萄球菌24h,龜分枝桿菌膿腫亞種72h),用5.0ml吸管吸取3.0 ml~5.0ml稀釋液加入斜面試管內,反復吹吸,洗下菌苔。隨后,用5.0ml吸管將洗液移至另一無菌試管中,用旋渦振蕩器混合(振蕩)20s(龜分支桿菌膿腫亞種ATCC 93326振蕩5min),以使細菌懸浮均勻。初步制成的菌懸液,先用細菌濃度比濁測定法粗測其含菌濃度,然后以稀釋液稀釋為108cfu/mL。


    三、試驗程序


    試驗方法:參考《消毒技術規范》2002年版 2.1.5.2.4 大腸桿菌殺滅試驗


    試驗過程:


    1.菌片的制備:載體片(定性濾紙片)大小10mm×10mm,將經滅菌的載體片平鋪于無菌平皿內,逐片滴加菌液。菌液滴加量每片為10μl。用10μl移液器接滅菌塑料吸頭滴染菌液,并用接種環涂勻整個載體表面。滴染菌液后,染菌載體可置37°℃溫箱內干燥(約20min~30min)后再使用。


    2. 菌片回收:取1菌片,放入到5ml0.9%氯化鈉溶液中,振蕩混勻,取0.5ml混合液加到4.5ml 0.9%氯化鈉溶液中,10倍稀釋至適宜濃度,取1ml進行活菌培養計數。菌片回收菌量應在5*105~5*106cfu/片范圍內。


    3. 殺滅程序:在生物安全柜中進試驗,試驗裝置包括燃燒艙(60L)和試驗艙(60L),將樣品在燃燒艙燃燒產生煙熏煙霧,在試驗艙加一抽氣泵將煙熏煙霧抽至實驗艙,調節流量計為5L/min(標準大氣壓),對放置在試驗艙中的菌片進行殺滅。


    4. 試驗程序:


    試驗組:每個菌株分別取兩片菌片置一無菌平皿中,共3個平皿,移至試驗艙中用燒杯墊高至中間位置。劑量設計為兩組,一組只燃燒一半長度的樣品,一組燃燒整只樣品。樣品燃燒到制定位置時,熄滅樣品,繼續通氣至試驗艙無煙霧,停止通氣,打開艙門,取出菌片,放入到含5ml營養肉湯試管中,混勻,作梯度稀釋,各稀釋度取1mL懸液做活菌培養計數,37℃培養(大腸桿菌和金黃色葡萄球菌培養48h,龜分枝桿菌膿腫亞種培養7天)。


    陽性對照組:將未殺滅的兩片菌片,置一無菌平皿中,放置于生物安全柜,待試驗組殺滅完畢后,取出菌片,放入到含5ml營養肉湯試管中,混勻,作梯度稀釋,各稀釋度取1mL懸液做活菌培養計數,37℃培養(大腸桿菌和金黃色葡萄球菌48h,龜分枝桿菌膿腫亞種7天)。


    陰性對照組:將空白載體樣品放入5ml營養肉湯試管,混勻,置37℃培養(大腸桿菌和金黃色葡萄球菌培養48h,龜分枝桿菌膿腫亞種培養7天)。


    重  復:試驗重復3次。陰性對照組應無菌生長,每次陽性對照回收菌數應達到5*105~5*106cfu/片。


    四、結果


    劑量組1,燃燒一半長度的樣品的殺滅試驗結果見表1;劑量組2,(燃燒整支長度)殺滅試驗試驗結果見表2。


    滅活效果測試.png

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    五、結論


    在本次試驗條件下,中藥艾條在燃燒一半時和燃燒一整支時對大腸桿菌ATCC 25922、金黃色葡萄球菌ATCC 6538、龜分支桿菌膿腫亞種ATCC 93326殺滅率均大于99%。


    客戶反饋


    客戶收到報告后非常滿意我們的專業程度,并為我們的服務提出的大大的好評。


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